血清使用常見問題和應(yīng)對方法

1、血清保存的最好方法？

   血清最好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶，建議無菌分裝于適當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)冷凍備用。

2、如何解凍血清，才能保證其質(zhì)量不會受損？

   我們建議將血清從冷凍箱取出后，置于2℃～8℃冰箱中解凍，然后在室溫下全融，解凍過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻，過大的溫差變化（-20℃～-37℃，溫差為57℃），極其容易造成血清析出沉淀。

注意：從低溫冰箱取出血清直接置于56℃水浴中更是極其殘忍的做法，是對血清的不負(fù)責(zé)任，對科學(xué)規(guī)則的無情踐踏！

3、為什么血清在解凍后會出現(xiàn)絮狀沉淀？應(yīng)該怎樣處理？

   血清中絮狀沉淀產(chǎn)生的原因有很多，其中zui普遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血清解凍后，也會存在于血清中，這也是造成沉淀的主要原因，但這些絮狀沉淀并不影響血清本身的質(zhì)量。欲去除沉淀，可采取自然沉降法或者將血清分裝于無菌離心管中，以400-600G離心5min,上清液即可加入培養(yǎng)基內(nèi)一起培養(yǎng)。我們不建議用過濾的方法去除絮狀沉淀，因為沉淀會阻塞濾膜，造成過濾困難或無法過濾，另一方面，過濾血清這種行為可能會導(dǎo)致血清中部分營養(yǎng)成分的流失。

4、為什么要熱滅活血清？有必要熱滅活嗎？

   加熱可以滅活血清中的補體系統(tǒng)，使補體去活化。通常未滅活的補體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放、激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，同時還能夠參與溶解細(xì)胞的過程。

  諸多研究表明大多數(shù)細(xì)胞的培養(yǎng)無須進行血清的熱滅活；實驗研究顯示，經(jīng)正確熱滅活處理的血清，對細(xì)胞的生長只有微小的促進或wan全沒有促進作用，而通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，造成細(xì)胞生長速率降低。并且熱處理過的血清，沉淀物明顯增多，有會使研究者誤以為是微生物的分裂增殖，因此，我們建議，若非必須，可以不進行熱處理。而在免疫學(xué)研究和ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)過程中，推薦使用熱滅活血清。

5、如何避免沉淀物的產(chǎn)生？

   建議您在血清使用的過程中，采用正確的解凍方法（冷凍→4℃→室溫），若血清解凍時改變的溫度太大（如冷凍→37℃）非常容易產(chǎn)生沉淀物。溫度過高、時間過久、搖晃不均勻等，都會造成沉淀增多，我們建議如非必要無須對血清進行滅活；若必須熱滅活，應(yīng)嚴(yán)格遵守56℃，30min的原則，并隨時搖晃均勻。

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